怎样进行高密度(HD)查找

一个高密度(HD)查找,也叫作放大查找,为您返回覆盖某一物种的特定基因组区域中的CGH和CHIP探针。关于高密度(HD)查找的综述,请参阅什么是高密度(HD)查找

基于您指定的要查找的染色体区域,eArray提供多种不同的从eArray高密度(HD)数据库获得高密度(HD)探针的方法。点击以下链接来查看怎样进行一次指定类型的查找。

进行标准基因组片段高密度(HD)查找

  1. 点击工作区标签(或进入一个合作)。

  2. 设置应用类型CGHChIP。

  3. 探针标签下,选择高密度(HD)探针查找。

    高密度(HD)查找框会出现。默认为标准高密度(HD)探针查找。

  4. 在“高密度(HD)查找方式”下拉式列表中,选择基因组片段。

  5. 设置以下必填的查找参数。带有红色星号"*"的参数为必填。其他参数为选填。在任何时候将所有参数恢复为初始值,点击重置。

参数

说明/详细

任务信息

查找名称

键入一个名称,帮助您日后能够识别此次查找的结果。

物种

从列表中选择想要的物种。关于所选物种的当前基因组版本的信息将出现在“版本号”处。

探针选项

筛选器

请选择以下选项之一。如果需要,会出现一个文本框让您填入一个筛选器的值。关于怎样在高密度(HD)查找中应用筛选器请点击 此处

无筛选器 – 不使用任何列表中的筛选器。

平均间距 – 在出现的文本框中输入碱基对的数目。这就为每个基因组片段,指定了所返回探针之间的平均间距(此间距是相邻探针中心点之间的碱基对距离)。请参阅 示例

每片段探针数 – 在出现的文本框中输入探针的数目。这就指定了高密度(HD)查找在每个基因组片段上返回的最大探针数目。请参阅 示例

探针总数 – 在出现的文本框中输入探针的数目。这就指定了高密度(HD)查找在所有指定基因组片段上返回的探针总数。请参阅 示例

安捷伦针对CGH微阵列的探针密度的指导

目录探针优先

(仅可用于CGH高密度探针查找) 如要在探针选择过程中优先选择安捷伦目录探针,请选中此复选框。这样,如果两个探针在一个给定的片段上彼此相近,高密度(HD)查找会选择安捷伦目录探针。

使用解链温度(TM)筛选器

对于CHIP高密度(HD)查找,请选择否。对于CGH高密度查找,eArray会自动将此筛选器应用与基因组片段查找。

安捷伦高密度数据库中的探针已经匹配了解链温度(Tm)。然而,不能通过安捷伦解链温度筛选器的探针也还可用。这些探针位于那些没有最优解链温度探针的区域。若要访问这些探针,请在使用解链温度(TM)筛选器处选择否。如果您只想使用解链温度匹配探针,请选择是。

相似度筛选器

这些选项可用于大多数“基因组片段高密度(HD)”查找。对于鼠和大鼠的CGH高密度查找,仅有“序列相似度筛选器”可用。

无筛选器 – 不应用相似度筛选器。如果您选择此选项,“使用非特异探针筛选器”复选框会出现。“非特异探针”是能够被定位于多个基因组位置的探针。选中此复选框来移除这些探针。

完全匹配筛选器 – 选择此选项后,如果一个探针的全部序列在基因组中出现多于一次,则此探针会被移除。

序列相似度筛选器 – 如果一个探针的全部序列与基因组中的多个位置有高度相似性,则此探针会被移除。

安捷伦针对HD-CGH查找中相似度筛选器的建议

使用“非唯一化探针探针”

(如果您在“相似度筛选器”处选择无筛选器,则此项可用) 非唯一化探针会在靶向基因映射到多个点位。在选中此复选框可以移除这些探针。

当您选择此选项时,最大完美基因组击中数就变为可用。默认值为1,会移除映射到多于一个基因组位置的探针。然而,您也可以将此值设为更高。例如,如果您输入的“最大完美基因组击中数”为3,那么仅当一个探针在靶向基因组中映射到四个或以上位置时会被移除。

片段选项

通过以下方式进行高密度(HD)查找

保持此参数设置为基因组片段。

延伸片段边界

输入5'端和3'端向外延长的碱基对数目。这将使您指定的所有基因组片段向两端延长,从而帮助您获取更多的探针,来覆盖您最初指定的基因组片段之外的区域。

例如,如果您在“5'端碱基对”处输入500,在“3'端碱基对”处输入300,eArray会将最初为 9000 – 10000的片段延伸为8500 – 10300。

基因组片段

在文字栏键入一个染色体位置或一个cytoband。您可以通过分隔符"|"来指定多个片段,但所有片段必须为同一类型的。请参阅基因组片段格式

若要上传一个染色体位置或cytoband的文件,请点击上传。请参阅为探针查找上传数据

包含区域

(仅可用于CGH高密度查找) 选择以下选项之一。您可以使用此参数来将您的CGH高密度探针查找限定为仅查找外显子、或仅查找基因内区域。

全部 – 返回的探针覆盖所指定的基因组区域的全部,既包括基因边界之内区域,也包括基因之外的区域。

外显子 – 返回的探针覆盖所指定的基因组区域的外显子部分。当您选定此选项时,“基因可信度”的列表会出现。您可以从中选择恰当的 基因可信度

基因内 – 返回在基因边界内的探针,无论该探针是否是在外显子区域内。当您选定此选项时,“基因可信度”的列表会出现。您可以从中选择恰当的 基因可信度

来自安捷伦的关于怎样将外显子(exon)作为靶向的附加指导

标准排除片段

安捷伦提供多个基于注释轨道的标准排除片段集合。如要忽略一个或多个集合中的基因组区域,请选中此选项,然后从出现的列表中选择想要的集合。按住Control键同时点击集合名称来选择多个。在一个高密度查找中,排除片段会被忽略,相应区域不会返回探针。

自定义排除片段

如要忽略在一个基因组片段文件中定义好的基因组片段,请选中此选项,然后点击上传片段文件。请参阅上传数据用于探针查找。在一个高密度查找中,排除片段会被忽略,相应区域不会返回探针。

 

  1. 点击查找。

    eArray将开始您要求的高密度(HD)查找,并且一个消息会通知您,您的查找已经被提交。

  2. 点击确认。

    “高密度(HD)探针查找”页面将在页面底部的“已提交的高密度(HD)查找结果”框中显示您的高密度(HD)查找,状态为未开始。当eArray开始进行您的高密度(HD)查找后,该查找的状态就变为查找中,接下来会变为完成。如果状态为失败,那就表示有错误出现,并且您必须重新提交该查找。点击刷新来查看当前的状态。在任务位置栏中,您可以跟踪每个高密度(HD)探针查找在队列中的位置。eArray会在完成您的查找后发送给您一封电子邮件。

    从查找结果框,您可以进行以下操作:

 

进行高级基因组片段高密度(HD)查找

在您开始之前,您必须拥有一个*.txt文件,包含查找片段的设置。请参阅上传数据至探针查找

  1. 点击工作区标签 (或进入一个合作)。

  2. 设置应用类型CGHChIP。

  3. 探针标签下,选择高密度(HD)探针查找,然后选择高级高密度(HD)探针查找。

    “高级高密度(HD)探针查找”框会出现。在“高密度(HD)查找方式”下拉式表单中,eArray会自动选择基因组片段。这是唯一一种可用于高级高密度(HD)查找的方式。

  4. 设置以下必填的查找参数。带有红色星号"*"的参数为必填。其他参数为选填。如要在任何时候将全部查找参数恢复为初始值,请点击重置。

参数

说明/详细信息

任务信息

查找名称

键入一个名称,帮助您日后能够识别此次查找的结果。

物种

从列表中选择想要的物种。关于所选物种的当前基因组版本的信息将出现在“版本号”处。

目录探针优先

(仅可用于CGH高密度探针查找) 如要在探针选择过程中优先选择安捷伦目录探针,请选中此复选框。这样,如果两个探针在一个给定的片段上彼此相近,高密度(HD)查找会选择安捷伦目录探针。

高级查找片段

请参照以下步骤来上传您的查找片段设置文件:

  1. 点击浏览。
    一个选择文件对话框会出现。

  2. 选择想要上传的查找片段文件,然后点击打开。
    该文件必须包含每个片段的必要的信息。请参阅上传数据至探针查找
    您的文件的位置将会出现在“高级查找片段”处。

  3. 点击上传。
    “查找片段预览”框将出现。该框列出了上传文件的前几行。如要显示全部行的列表,请点击显示全部。

  4. 如果您上传文件的第一行包含栏目标题,请选中我的上传文件包含“栏目标题”。
    这就防止eArray将您的栏目标题行解析为实际的查找区域信息。eArray是按照栏目顺序来解析您上传文件的信息的,而不是按照栏目标题。

片段选项

通过以下方式进行高密度(HD)查找

此参数设置为基因组片段,且不能被更改。

延伸片段边界

输入5'端和3'端向外延长的碱基对数目。这将使您指定的所有基因组片段向两端延长,从而帮助您获取更多的探针,来覆盖您最初指定的基因组片段之外的区域。

例如,如果您在“5'端碱基对”处输入500,在“3'端碱基对”处输入300,eArray会将最初为 9000 – 10000的片段延伸为8500 – 10300。

包含区域

(仅可用于CGH高密度查找) 选择以下选项之一。您可以使用此参数来将您的CGH高密度探针查找限定为仅查找外显子、或仅查找基因内区域。

全部 – 返回的探针覆盖所指定的基因组区域的全部,既包括基因边界之内区域,也包括基因之外的区域。

外显子 – 返回的探针覆盖所指定的基因组区域的外显子部分。当您选定此选项时,“基因可信度”的列表会出现。您可以从中选择恰当的 基因可信度

基因内 – 返回在基因边界内的探针,无论该探针是否是在外显子区域内。当您选定此选项时,“基因可信度”的列表会出现。您可以从中选择恰当的 基因可信度

来自安捷伦的关于怎样将外显子(exon)作为靶向的附加指导

标准排除片段

安捷伦提供多个基于注释轨道的标准排除片段集合。如要忽略一个或多个集合中的基因组区域,请选中此选项,然后从出现的列表中选择想要的集合。按住Control键同时点击集合名称来选择多个。在一个高密度查找中,排除片段会被忽略,相应区域不会返回探针。

自定义排除片段

如要忽略在一个基因组片段文件中定义好的基因组片段,请选中此选项,然后点击上传片段文件。请参阅上传数据用于探针查找。在一个高密度查找中,排除片段会被忽略,相应区域不会返回探针。

 

  1. 点击查找。

    eArray将开始您要求的高密度(HD)查找,并且一个消息会通知您,您的查找已经被提交。

  1. 点击确认。

    “高密度(HD)探针查找”页面将在页面底部的“已提交的高密度(HD)查找结果”框中显示您的高密度(HD)查找,状态为未开始。当eArray开始进行您的高密度(HD)查找后,该查找的状态就变为查找中,接下来会变为完成。如果状态为失败,那就表示有错误出现,并且您必须重新提交该查找。点击刷新来查看当前的状态。在任务位置栏中,您可以跟踪每个高密度(HD)探针查找在队列中的位置。eArray会在完成您的查找后发送给您一封电子邮件。

    从查找结果框,您可以进行以下操作:

 

进行标准探针ID号高密度(HD)查找

在您开始之前,您必须拥有一个*.txt文件,包含查找片段的设置。请参阅上传数据至探针查找

  1. 点击工作区标签 (或进入一个合作)。

  2. 设置应用类型CGHChIP。

  3. 探针标签下,选择高密度(HD)探针查找

    “高密度(HD)探针查找”框会出现。

  4. 高密度(HD)查找方式下拉式列表中,选择探针ID号。

  5. 按需要设置以下可选参数。在任何时候将所有参数恢复为初始值,点击复位。

参数

说明/详细信息

查找名称

键入一个名称,帮助您日后能够识别此次查找的结果。

探针ID号

输入至少一个探针ID号。多个探针ID号使用分隔符"|"进行分隔。例如,A_14_P100053| A_14_P100055|A_14_P100056

您可以上传一个包含探针ID号的*.txt文件。请参照以下步骤:

  1. 点击上传。
    一个新窗口会出现。

  2. 点击浏览。
    一个选择文件对话框会出现。

  3. 选择想要上传的探针ID号文件,然后点击打开。
    请参阅上传数据至探针查找
    关于文件格式的要求信息,请参阅上传数据至探针查找

  4. 点击上传文件。
    探针的名称会出现在“探针ID号”处。

通过以下方式进行高密度(HD)查找

保持此参数设置为探针ID号。

物种

从列表中选择想要的物种。关于所选物种的当前基因组版本的信息将出现在“版本号”处。

  1. 点击查找。

    eArray将开始您要求的高密度(HD)查找,并且一个消息会通知您,您的查找已经被提交。

  1. 点击确认。

    “高密度(HD)探针查找”页面将在页面底部的“已提交的高密度(HD)查找结果”框中显示您的高密度(HD)查找,状态为未开始。当eArray开始进行您的高密度(HD)查找后,该查找的状态就变为查找中,接下来会变为完成。如果状态为失败,那就表示有错误出现,并且您必须重新提交该查找。点击刷新来查看当前的状态。在任务位置栏中,您可以跟踪每个高密度(HD)探针查找在队列中的位置。eArray会在完成您的查找后发送给您一封电子邮件。

    从查找结果框,您可以进行以下操作:

 

进行标准基因注释高密度(HD)查找

此查找方法仅可用于CGH高密度探针查找。

  1. 点击工作区标签 (或进入一个合作)。

  2. 设置应用类型CGH

  3. 探针标签下,选择高密度(HD)探针查找,

    “高密度(HD)探针查找”框会出现。

  4. 高密度(HD)查找方式下拉式列表中,选择基因注释。

  5. 按需要设置以下可选参数。带有红色星号"*"的参数为必填。其他参数为选填。在任何时候将所有参数恢复为初始值,点击复位。

参数

说明/详细

任务信息

查找名称

键入一个名称,帮助您日后能够识别此次查找的结果。

物种

从列表中选择想要的物种。关于所选物种的当前基因组版本的信息将出现在“版本号”处。

探针选项

筛选器

请选择以下选项之一。如果需要,会出现一个文本框让您填入一个筛选器的值。关于怎样在高密度(HD)查找中应用筛选器请点击 此处

无筛选器 – 不使用任何列表中的筛选器。

平均间距 – 在出现的文本框中输入碱基对的数目。这就为每个基因组片段,指定了所返回探针之间的平均间距(此间距是相邻探针中心点之间的碱基对距离)。请参阅 示例

每片段探针数 – 在出现的文本框中输入探针的数目。这就指定了高密度(HD)查找在每个基因组片段上返回的最大探针数目。请参阅 示例

探针总数 – 在出现的文本框中输入探针的数目。这就指定了高密度(HD)查找在所有指定基因组片段上返回的探针总数。请参阅 示例

安捷伦针对CGH微阵列的探针密度的指导

目录探针优先

(仅可用于CGH高密度探针查找) 如要在探针选择过程中优先选择安捷伦目录探针,请选中此复选框。这样,如果两个探针在一个给定的片段上彼此相近,高密度(HD)查找会选择安捷伦目录探针。

使用解链温度(TM)筛选器

对于CHIP高密度(HD)查找,请选择否。对于CGH高密度查找,eArray会自动将此筛选器应用与基因组片段查找。

安捷伦高密度数据库中的探针已经匹配了解链温度(Tm)。然而,不能通过安捷伦解链温度筛选器的探针也还可用。这些探针位于那些没有最优解链温度探针的区域。若要访问这些探针,请在使用解链温度(TM)筛选器处选择否。如果您只想使用解链温度匹配探针,请选择是。

相似度筛选器

这些选项可用于大多数“基因组片段高密度(HD)”查找。对于鼠和大鼠的CGH高密度查找,仅有“序列相似度筛选器”可用。

无筛选器 – 不应用相似度筛选器。如果您选择此选项,“使用非特异探针筛选器”复选框会出现。“非特异探针”是能够被定位于多个基因组位置的探针。选中此复选框来移除这些探针。

完全匹配筛选器 – 选择此选项后,如果一个探针的全部序列在基因组中出现多于一次,则此探针会被移除。

序列相似度筛选器 – 如果一个探针的全部序列与基因组中的多个位置有高度相似性,则此探针会被移除。

安捷伦针对HD-CGH查找中相似度筛选器的建议

使用“非唯一化探针探针”

(如果您在“相似度筛选器”处选择无筛选器,则此项可用) 非唯一化探针会在靶向基因映射到多个点位。在选中此复选框可以移除这些探针。

当您选择此选项时,最大完美基因组击中数就变为可用。默认值为1,会移除映射到多于一个基因组位置的探针。然而,您也可以将此值设为更高。例如,如果您输入的“最大完美基因组击中数”为3,那么仅当一个探针在靶向基因组中映射到四个或以上位置时会被移除。

片段选项

通过以下方式进行高密度(HD)查找

保持此参数设置为基因组片段。

延伸片段边界

输入5'端和3'端向外延长的碱基对数目。这将使您指定的所有基因组片段向两端延长,从而帮助您获取更多的探针,来覆盖您最初指定的基因组片段之外的区域。

例如,如果您在“5'端碱基对”处输入500,在“3'端碱基对”处输入300,eArray会将最初为 9000 – 10000的片段延伸为8500 – 10300。

基因注释

(必填)输入一个基因注释,例如GenBank登录号(例如,NM_016660 or AY884282) 或者一个基因符号 (例如,H3N2 or CTSB) 。使用分隔符“|”分隔多个注释。

您也可以上传一个带有基因符号的*.txt文件。更多关于文件格式的信息,请参阅上传数据用于探针查找。请参照以下步骤:

  1. 点击上传。
    一个文件名称窗口会出现。

  2. 点击浏览。
    一个文件浏览窗口会出现。

  3. 选择想要的文件,点击打开。
    该文件的位置会出现在“文件名称”处。

  4. 点击上传文件。eArray就会上传该基因注释,并在高密度查找框中以分隔符分隔来显示它们。

包含区域

(仅可用于CGH高密度查找) 选择以下选项之一。您可以使用此参数来将您的CGH高密度探针查找限定为仅查找外显子、或仅查找基因内区域。

全部 – 返回的探针覆盖所指定的基因组区域的全部,既包括基因边界之内区域,也包括基因之外的区域。

外显子 – 返回的探针覆盖所指定的基因组区域的外显子部分。当您选定此选项时,“基因可信度”的列表会出现。您可以从中选择恰当的 基因可信度

基因内 – 返回在基因边界内的探针,无论该探针是否是在外显子区域内。当您选定此选项时,“基因可信度”的列表会出现。您可以从中选择恰当的 基因可信度

来自安捷伦的关于怎样将外显子(exon)作为靶向的附加指导

标准排除片段

安捷伦提供多个基于注释轨道的标准排除片段集合。如要忽略一个或多个集合中的基因组区域,请选中此选项,然后从出现的列表中选择想要的集合。按住Control键同时点击集合名称来选择多个。在一个高密度查找中,排除片段会被忽略,相应区域不会返回探针。

自定义排除片段

如要忽略在一个基因组片段文件中定义好的基因组片段,请选中此选项,然后点击上传片段文件。请参阅上传数据用于探针查找。在一个高密度查找中,排除片段会被忽略,相应区域不会返回探针。

  1. 点击查找。

    eArray将开始您要求的高密度(HD)查找,并且一个消息会通知您,您的查找已经被提交。

  1. 点击确认。

    “高密度(HD)探针查找”页面将在页面底部的“已提交的高密度(HD)查找结果”框中显示您的高密度(HD)查找,状态为未开始。当eArray开始进行您的高密度(HD)查找后,该查找的状态就变为查找中,接下来会变为完成。如果状态为失败,那就表示有错误出现,并且您必须重新提交该查找。点击刷新来查看当前的状态。在任务位置栏中,您可以跟踪每个高密度(HD)探针查找在队列中的位置。eArray会在完成您的查找后发送给您一封电子邮件。

    从查找结果框,您可以进行以下操作:

相关链接

查看高密度(HD)查找的结果

高密度(HD)查找结果的应用

什么是高密度(HD)查找

查看高密度(HD)查找的查找准则

上传数据至探针查找